HARA人肺癌鱗癌細胞

二、使用方法
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1.收到細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快和我們聯系。
2.如包裝完好，取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒,拆下封口膜,在顯微鏡下觀察細胞形態是否正常，細胞的貼壁情況以及細胞密度,然后放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置2-3h，以穩定細胞狀態。
3.細胞狀態穩定后，棄除培養瓶中大部分液體，只剩5-10ml左右培養液繼續培養就可以了，超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。
如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心3-5Min,吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
4.細胞傳代
1)吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS 2-3ml清洗細胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1.5ml至培養瓶中，37℃溫浴1-2min左右;倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻，按1:2適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5ml，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養;
4)待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
三、注意事項
1.在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作;
2.傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態;
3.該細胞只可用于科研。
剛收到細胞時，胎牛血清可以用15%培養兩三天，利于細胞盡快恢復狀態，細胞穩定后
再調回10%即可
  收到細胞后如細胞狀態不佳，或培養中遇到問題，煩請當天盡快聯系，以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要參考依據，請您務必重視。

HARA人肺癌鱗癌細胞

稀釋方法：

     方法1. 實驗前，將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋（或PBS稀釋），將稀釋后的抗體分裝5-10支（20ulx5支或10ulx10支），放入-20℃保存，用一支拿一支，避免反復凍溶。

     方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul（或PBS稀釋50ul）成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存，用多少吸多少。方法3. 預試驗可做幾個梯度1：100、200、400背景高還可做上去，選一個 的稀釋比例，再正式做，效果。工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。 公司產品經無數次市場驗證，若出現質量問題可無條件換貨或退貨。

常用免疫組織化學方法的原理：

      1. 免疫熒光細胞化學技術：將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后會發出一定波長的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量。

       2. 免疫酶細胞化學技術：是目前免疫組織化學研究中zui常用的技術．基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細胞或組織內的相應抗原進行定位或定性研究。
       3. 免疫膠體金技術：就是用膠體金標記一抗，二抗或其他的能特異性的結合免疫球蛋白的分子（如葡萄球菌A蛋白）等作為探針對組織或細胞內的抗原進行定性，定位或定量研究．由于膠體金的電子密度高，多用于免疫電鏡的單標記或多標記的定位研究。
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