新生牛血清質(zhì)量如何控制?

　　胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然，胎牛血清是品質(zhì)高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分少。

　　①新生牛血清應(yīng)無細(xì)菌、支原體污染。血清中含有細(xì)菌會(huì)直接造成細(xì)胞污染、制品污染，因此無菌是基本的要求。另外細(xì)菌會(huì)產(chǎn)生內(nèi)毒素，也稱脂多糖。內(nèi)毒素可以引起發(fā)熱反應(yīng)、白細(xì)胞反應(yīng)、代謝性酸中毒、感染性休克、彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)。人及哺乳動(dòng)物對內(nèi)毒素異常敏感，疫苗中的內(nèi)毒素含量高會(huì)引起人及動(dòng)物的強(qiáng)烈反應(yīng)，甚至被致死。所以生物制品及其原輔料對內(nèi)毒素要求嚴(yán)格控制。按鱟試劑或內(nèi)毒素檢測儀操作程序測定，新生牛血清中的細(xì)菌內(nèi)毒素含量應(yīng)低于10EU/mL。

　　②新生牛血清中應(yīng)無牛病毒性腹瀉/黏膜病病毒(BVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)等外源病毒污染。含有口蹄疫病毒抗體的新生牛血清對口蹄疫疫苗的生產(chǎn)干擾非常大，含有牛病毒性腹瀉/黏膜病病毒抗體的新生牛血清對豬瘟活疫苗(細(xì)胞源)的生產(chǎn)干擾非常大。其他病的抗體也需要盡可能控制，抗體存在會(huì)影響生物制品的質(zhì)量。

　　③細(xì)胞增殖高質(zhì)量的血清含有豐富的細(xì)胞生長必需的營養(yǎng)成分，它提供細(xì)胞貼壁所需的因子，還起著緩沖酸堿度、提供解毒、保護(hù)細(xì)胞不受傷害等作用。用Sp2/0小鼠骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞增殖試驗(yàn)測定標(biāo)準(zhǔn)血清(胎牛血清)的絕對克隆形成率和新生牛血清的相對克隆形成率，規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)血清的絕對克隆形成率應(yīng)不低于20%，胎牛血清的相對克隆形成率應(yīng)不低于80%，新生牛血清的相對克隆形成率應(yīng)不低于50%。

　　④新生牛血清中血清蛋白含量應(yīng)在3、5%～5、0%(w/v)。新生牛出生14h內(nèi)采血制備的血清，其血清蛋白含量一般都在這個(gè)范圍之內(nèi)，并且，采血時(shí)間越短，測定值越接近下限，小牛出生后存活的時(shí)間越長，其血清中的蛋白含量測定值越接近上限。

　　⑤新生牛血清中的血紅蛋白含量應(yīng)不高于0。02%(w/v)。血紅蛋白的含量直接影響血清中刺激細(xì)胞生長因子的活力。血紅蛋白含量高的血清，顏色為暗紅色，質(zhì)量較差。

　　新生牛血清的成分

　　血清的成分雖然比較簡單，但是還是有很多成分沒有被破解，這也是一直讓科研人員頭痛的一件事，并且新生牛血清的成分還受供體的一些因素所影響，例如供體的年齡和生理狀況，這些都會(huì)影響血清的成分，所以研究血清成分也是一件比較復(fù)雜的工作，那么新生血清有哪些成分?

　　1.蛋白質(zhì)

　　新生牛血清的服務(wù)商介紹，新生牛血清中的主要成份中除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外，主要還有白蛋白，球蛋白。纖維粘連素 細(xì)胞促進(jìn)細(xì)胞附著;胎牛血清中含胎球蛋白促細(xì)胞依附;轉(zhuǎn)鐵蛋白可以結(jié)合鐵離子，減少其毒性會(huì)被細(xì)胞利用的可能。

　　2.多肽

　　血小板促生長因子能促細(xì)胞分裂，據(jù)專人介紹新生牛血清是多肽家族的重要成員，多肽擁有著重要的作用，比如它可以促進(jìn)細(xì)胞增殖因子數(shù)量的增加，不僅如此，它還能夠促成纖維細(xì)胞生長因子以及神經(jīng)細(xì)胞生長因子等，據(jù)悉，雖然從數(shù)量上來看新生牛血清的含量比例少，但它能夠促進(jìn)細(xì)胞的增長。

　　3.激素

　　激素對細(xì)胞的作用是多方面的，胰島素是可以促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸，與促細(xì)胞分裂有關(guān)。而類胰島素生長因子能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合，從而有胰島素同樣的作用。促生長激素：促細(xì)胞增殖效應(yīng)。氫化ke的松：技術(shù)先進(jìn)的新生牛血清中含有定量的該成分，它可能兼有促細(xì)胞貼附和增殖作用，但有人證明，血清中的氫化ke的松，如細(xì)胞密度高時(shí)可能有抑制細(xì)胞的作用和誘導(dǎo)其發(fā)生分化。

　　4.其他成份

　　新生牛血清中的氨基酸、葡萄糖、酮酸等對多種營養(yǎng)成分的合成培養(yǎng)基意義不大，與蛋白相結(jié)合狀態(tài)的微量元素對細(xì)胞培養(yǎng)有意義。

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