人正常膀胱上皮細胞(SV-HUC-1)

細胞介紹

這株細胞是正常輸尿管組織用SV40病毒轉染建株的。反復用非洲綠猴腎細胞平 板測試檢測傳染性SV40的生成，結果都呈陰性。

細胞特性

1)來源：膀胱

2)形態：上皮細胞

3)含量：>lxl06 個/mL

4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5)規格：T25瓶或者lmL凍存管包裝

運輸和保存：使用含有胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后， 可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦 使用的培養基后轉移至l〇cm培養皿或者T25培養瓶中培養，傳代達到細胞生長 狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

細胞用途：僅供科研使用。

細胞培養步驟

1)培養基及培養凍存條件準備：

1.準備 F-12K 培養基（GIBCO，21127-022)，90%;胎牛血清，10%。

2.培養條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱 濕度為70%-80%。

3. 凍存液：90%*培養基，10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

2)細胞處理：

復蘇細胞：將含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加 入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補 加l-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將 細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢 查細胞密度。

細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中，置于37°C培

養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部 分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止 消化。

按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分 鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養液后吹勻。

將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者

細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄 去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約lml含血清的培養基后 加入凍存管中，再添加1〇%DMSO后進行凍存。

注意事項：

收到細胞后，若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立 即與我們聯系。

所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注 意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

瓶中。